Nhuộm hydroxit sắt (theo hale )

Website CLBV.VN và các nền tảng trong hệ sinh thái QuanTriBenhVien.Vn được xây dựng bởi các thành viên có kinh nghiệm tại các bệnh viện, công ty. Web không có liên quan tới bất kỳ Vụ, Cục nào của BYT hay SYT --> chi tiết

Nội dung bạn cần không thấy trên website, có thể do bạn chưa đăng nhập hoặc tài khoản đã hết hạn. Nếu là thành viên của website, bạn cũng có thể yêu cầu trong nhóm Zalo "CLBV Members" các nội dung bạn quan tâm.

Kính gửi Anh/Chị/Em đồng nghiệp,

Trong thời gian qua, CLBV nhận được sự ủng hộ rất lớn từ cộng đồng. Website đã nằm trong nhóm đầu kết quả tìm kiếm với nhiều từ khóa liên quan đến Quản lý chất lượng (QLCL) và An toàn người bệnh (ATNB) trong lĩnh vực y tế.

Tuy nhiên, khi lượng truy cập ngày càng tăng, Công ty M.I.U nhận thấy một số vấn đề cần được điều chỉnh để đảm bảo phù hợp với đặc thù chuyên môn:

1. Nội dung QLCL & ATNB có tính chuyên ngành cao

Nhiều nội dung mang tính học tập từ sự cố, cải tiến sau sai sót.
Nếu tiếp cận ngoài bối cảnh chuyên môn, có thể bị hiểu chưa đầy đủ hoặc sai lệch.

2. Một số tài liệu quản trị cần được sử dụng đúng đối tượng

Dù là văn bản công khai, việc áp dụng hiệu quả đòi hỏi hiểu đúng bối cảnh ngành.
Phù hợp hơn khi chia sẻ trong cộng đồng những người trực tiếp làm công tác y tế.

3. Hạn chế nguy cơ nhầm lẫn về nhận diện

Tên miền clbv.vn có thể gây hiểu nhầm với các hệ thống chính thức của Bộ Y tế.
Việc làm rõ và chuẩn hóa nhận diện là cần thiết.

Công ty M.I.U quyết định nâng cấp hệ thống phục vụ đúng đối tượng chuyên môn

Để đảm bảo chất lượng nội dung và phục vụ tốt hơn cho cộng đồng, chúng tôi thực hiện các điều chỉnh:

Giới hạn truy cập nội dung: Website dành cho thành viên đã đăng ký, là các đồng nghiệp đang công tác trong lĩnh vực y tế.
Chuyển đổi nhận diện sang tên miền mới: QLCL.NET để đồng bộ thương hiệu với các trang trong hệ sinh thái QuanTriBenhVien.Vn như KHTH.VN; CNTT.IT; KSNK.VN; VTTB.VN; HCQT.VN ... hướng đến chia sẻ kiến thức quản trị hiện đại, liên ngành trong bệnh viện không chỉ giới hạn ở QLCL & ATNB.

Chúng tôi tin rằng đây là bước điều chỉnh cần thiết nhằm:

Bảo vệ giá trị chuyên môn của nội dung.
Đảm bảo thông tin được sử dụng đúng đối tượng, đúng bối cảnh.
Xây dựng cộng đồng chia sẻ chất lượng, hiệu quả.

Rất mong tiếp tục nhận được sự đồng hành của Anh/Chị/Em đồng nghiệp.

Công ty M.I.U

1. NGUYÊN LÝ

Phương pháp nhuộm dựa vào ái lực của sắt (hoá trị 3) với các nhóm axit. Cơ chế hoá học chính xác của hiện tượng gắn kết này vẫn còn chưa sáng tỏ. Tuy nhiên, hydroxit sắt dạng keo, ngay khi được cố định, sẽ có thể được phát hiện ở bước nhuộm thứ 2 với ferrocyanur kali (phản ứng sẽ cho màu xanh).

2. CHUẨN BỊ

2.1. Người thực hiện

Kỹ thuật viên giải phẫu bệnh - tế bào bệnh học: 02

2.2. Phương tiện, hóa chất

2.2.1. Phương tiện, hóa chất chung

- Dung dịch cố định bệnh phẩm.	- Bể nhuộm bằng thủy tinh.
- Cồn (70^o, 80^o, 95^o, 100^o).	- Bể thủy tinh đựng cồn, xylen.
- Xylen hay toluen.	- Hộp bằng thép không rỉ đựng parafin.
- Nước cất 2 lần.	- Khuôn nhựa.
- Parafin.	- Giá đựng tiêu bản (đứng và nằm ngang).
- Sáp ong.	- Cốc đong loại 1000ml, 500ml, 100ml và 50ml.
- Albumin + glyxerin.	- Ống hút bằng nhựa, quả bóp cao su hút hóa chất.
- Máy đo độ pH điện tử.	- Kẹp không mấu, kéo.
- Máy chuyển bệnh phẩm tự động.	- Cân phân tích.
- Máy đúc khối parafin.	- Giấy lọc.
- Bàn hơ dùng điện.	- Phiến kính, lá kính.
- Máy cắt lát mỏng (microtome).	- Axit picric ngâm, làm sạch phiến kính.
- Lưỡi dao cắt lát mỏng.	- Bôm Canada hoặc keo gắn lá kính.
- Lò nấu parafin.	- Kính hiển vi 2 mắt để kiểm tra kết quả nhuộm.
- Tủ ấm 37^o và 56^o.	- Kính phòng hộ, găng tay các loại, mặt nạ phẫu thuật, áo choàng phẫu thuật.
- Tủ lạnh.
- Điều hòa nhiệt độ.
- Tủ hốt phòng thí nghiệm. - Nguồn cấp nước chảy.

2.2.2. Phương tiện, hóa chất riêng biệt cho kỹ thuật

- Phẩm nhuộm (hoặc dùng phẩm nhuộm có sẵn của các hãng hoặc pha như hướng dẫn ở III.6.1 dưới đây): FeCl2, axit acetic đặc, đỏ nhân, Kernechtrot, sunfat nhôm.

3. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

3.1. Cố định

Bệnh phẩm được lấy ra khỏi cơ thể được cố định ngay trong dung dịch formol đệm trung tính 10% với tỷ lệ thể tích dung dịch cố định nhiều gấp 20 -30 lần thể tích bệnh phẩm. Thời gian cố định từ 2-12 giờ tuỳ theo mảnh bệnh phẩm to hay nhỏ.
Sau cố định, bệnh phẩm được thực hiện qua các khâu kỹ thuật sau:

3.2. Chuyển bệnh phẩm

3.3. Vùi parafin

3.4. Đúc khối parafin

3.5. Cắt và dán mảnh cắt

3.6. Nhuộm mảnh cắt

3.6.1. Chuẩn bị phẩm nhuộm

a. Dung dịch mẹ hydroxit sắt dạng keo

- Nước cất: 250 ml
- Clorua sắt (29%): 4,4ml
Thêm clorua sắt cho đến khi nước cất sôi lên.
Chờ cho dung dịch chuyển sang màu đỏ thẫm, để vào lạnh.
Dung dịch được bảo quản tối đa trong 2 tháng.

b. Dung dịch làm việc

- Axit acetic đậm đặc:	5 ml
- Dung dịch mẹ:	20 ml
- Nước cất:	15ml

c. Đỏ nhân

- Kernechtrot:	0,5g
- Sunfat nhôm:	12,5g
- Nước cất:	250 ml

Hòa tan bằng cách đun nóng. Thêm ít tinh thể thymol.
Bảo quản trong tủ lạnh.

3.6.2. Tiến hành kỹ thuật

1. Tẩy parafin các mảnh cắt bằng 3 bể toluen (xylen), mỗi bể 2 phút
2. Chuyển vào các bể cồn 100°, 95°, 80° mỗi bể 2 phút
3. Rửa nước
4. Nhúng mảnh cắt rất nhanh vào dung dịch axit acetic 12%
5. Không rửa; đặt các mảnh cắt vào trong dung dịch làm việc khoảng 1 giờ
6. Rửa trong 4 bể axit acetic 12% (3 phút mỗi bể)
7. Đặt mảnh cắt vào trong dung dịch Ferrocyanua Kali (2%) + HCl (2%)với thể tích bằng nhau, khoảng 20 phút
8. Rửa nước chảy rồi qua nước cất
9. Nhuộm nhân bằng đỏ nhân trong 3 - 10 phút
10. Rửa trong nước chảy, rồi nước cất.
11. Làm mất nước nhanh bằng cồn 95º và cồn tuyệt đối
12. Làm trong bằng 3 bể toluen sạch
13. Gắn lá kính như thường lệ

4. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Mucopolysaccarit axit: xanh đậm.

5. MỘT SỐ SAI SÓT VÀ CÁCH XỬ TRÍ

Ở pH 3,1 và 2,5, màu xanh cho biết hầu hết là các mucin axit (trừ một số nhóm sunphat hóa mạnh). Ở pH 1,0, chỉ các mucin axit sunphat hóa yếu có màu xanh, trong khi ở pH 0,2, mucin axit sunphat hóa mạnh lại bắt màu xanh.