1. NGUYÊN LÝ
Kỹ thuật nhuộm băng G được sử dụng để nhuộm nhiễm sắc thể ở kỳ giữa. Nhiễm sắc thể (nhiễm sắc thể) ở kỳ giữa được xử lý bằng enzym phân giải protein và được nhuộm với Giemsa. Băng tối là đoạn ADN giàu A, T (ngược lại với băng R), băng sáng là những đoạn giàu G, C. Phương pháp được sử dụng để nhận dạng các nhiễm sắc thể và phát hiện bất thường nhiễm sắc thể, dựa vào đặc điểm các băng sáng tối trên mỗi nhiễm sắc thể.
2. CHỈ ĐỊNH
Kỹ thuật này được sử dụng trong xét nghiệm công thức nhiễm sắc thể máu ngoại vi/tủy xương được để nhận diện bất thường nhiễm sắc thể..
3. CHỐNG CHỈ ĐỊNH
Không có chống chỉ định.
4. CHUẨN BỊ
4.1. Người thực hiện
Kỹ thuật viên xét nghiệm di truyền đã được đào tạo.
4.2. Phương tiện - Hóa chất
4.2.1. Phương tiện
- 02 cóng Coplin jar;
- 03 cốc thủy tinh 100ml;
- 01 cặp không mấu.
4.2.2. Hóa chất
- Enzym phân giải protein (trypsin);
- Đệm pH 6,8 (KH2PO4: 9,1g/l; Na2HPO4.2H2O: 11,5g/l);
- Chất ức chế enzym (huyết thanh bào thai bê - FBS);
- Nước muối 9‰.
4.3. Bệnh phẩm
Tiêu bản nhiễm sắc thể kì giữa đã được sấy khô (theo quy trình “Xét nghiệm công thức Nhiễm sắc thể”).
5. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
5.1. Chuẩn bị
5.1.1. Chuẩn bị tiêu bản
Tiêu bản sau khi thu hoạch được cho vào tủ sấy 50-60oC 24 giờ, hoặc để khô tự nhiên 3 ngày trở lên.
5.1.2. Chuẩn bị hóa chất
- Cốc 1: Pha 0.05g trypsin bột vào 50ml nước muối 0.9‰;
- Cốc 2: Pha 100ml FBS 2%;
- Cốc 3: Nước muối 9‰;
- Cốc 4: Nước muối 9‰;
- Cốc 5: Pha Giêmsa 10% trong đệm pH 6,8;
- Cốc 6: Đệm pH 6,8.
5.2. Tiến hành kỹ thuật
- Nhúng tiêu bản trong cốc 1 từ 1-2 phút;
- Chuyển sang cốc 2/30 giây;
- Chuyển sang cốc 3/15 giây;
- Chuyển sang cốc 4/15 giây;
- Chuyển sang cốc 5/10 phút;
- Chuyển sang cốc 6/15 giây;
- Rửa dưới vòi nước chảy
6. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Tiêu bản sau khi nhuộm băng G được phân tích bất thường về số lượng, cấu trúc trên kính hiển vi ở độ phóng đại 1.000 lần và được phân tích bằng phần mềm chuyên dụng.
7. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Margaret J. Barch, (1991), “The ACT Cytogenetics Laboratory Manual”, Raven press.
2. Phạm Quang Vinh, Đỗ Trung Phấn, (2009), “Các kỹ thuật nhuộm nhiễm sắc thể”, “Kỹ thuật huyết học và truyền máu ứng dụng trong lâm sàng”, Nhà xuất bản Y học, pp110-119.
- Đăng nhập để gửi ý kiến
